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紫外可見分光光度計校正方法
日期：2025-08-10 18:11
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摘要：
我們知道，分光光度法的*重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果，準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度，可通過足夠數量測量的統計處理來減少；系統誤差影響測量結果的準確度，可在大體相同實驗條件下，用比較一種物質的準確測量結果，使系統誤差統一起來。而分光光度計的系統誤差（波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程）和操作誤差（溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度...
我們知道，分光光度法的*重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果，準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度，可通過足夠數量測量的統計處理來減少；系統誤差影響測量結果的準確度，可在大體相同實驗條件下，用比較一種物質的準確測量結果，使系統誤差統一起來。而分光光度計的系統誤差（波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程）和操作誤差（溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH）對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關于操作誤差，多數情況下，通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關于儀器的系統誤差，可通過對分光光度計的定期校正來克服，若所需準確度很高的測量，則必須天天校正。
雜散光的校正方法
小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差，它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光，且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶，亦可用Beer-Lambert定律來檢查，但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大于0.1%，應設法減低，或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比，因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外，還可用一個適當的濾光片，該濾光片在測定波長范圍內完全透光，但吸收此范圍外的光波，由此來消除雜散光。
